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分光光度計的測定條件如何選擇?

更新時間:2020-03-23點擊次數(shù):7554
       分光光度計可滿足各種應(yīng)用的要求,可用在生物研究、生物工業(yè)、藥物分析、制藥、教學(xué)研究、 環(huán)保、食品衛(wèi)生、臨床檢驗、衛(wèi)生防疫等領(lǐng)域。
  分光光度計的光源燈采用6V/10W插入式鎢鹵素燈,更換時應(yīng)先切斷電源,取出損壞的鎢鹵素燈,換上新燈,將儀器的波長置于500nm處,開啟儀器電源,移動燈上、下、左、右位置,直到成象在進狹縫上。在T狀態(tài),不調(diào)節(jié)100%鍵,(蓋上樣品室蓋)觀察顯示讀數(shù),調(diào)整燈使顯示讀數(shù)為高即可。
  分光光度計的測定條件的選擇:
  一、入射光波長的選擇
  在大吸收波長處測定吸光度不僅能獲得高的靈敏度,而且還能減少由非單色光引起的對朗伯-比爾定律的偏離。因此在分光光度計的分光光度法測定中一般選擇大吸收波長為入射波長。
  二、參比溶液的選擇
  在實驗中,要選擇合適的空白溶液作為參比溶液來調(diào)節(jié)分光光度計的零點,以便消除顯色溶液中其他有色物質(zhì)的干擾,抵消吸收池和試劑對入射光的影響。根據(jù)試樣溶液的性質(zhì),選擇合適組分的參比溶液很重要。
  三、吸光度范圍選擇與控制
  任何分光光度計都有一定的測量誤差,測量誤差的來源主要是光源的發(fā)光強度不穩(wěn)定法,光電效應(yīng)的非線性,電位計的非線性,雜散光的影響,單色器的光不純等因素,對于一臺固定的分光光度計來說,以上因素都是固定的,也就是說它的誤差具有一定穩(wěn)定性。
  四、比色皿的使用
  選擇適宜規(guī)格的比色皿,盡量把吸光度值調(diào)整在0.2~0.8之間。同一實驗使用同一規(guī)格的同一套比色皿,以減少測量誤差,所以用普通分光光度法不適用于高含量或較低含量物質(zhì)的測定。
  分光光度計是一種常用的實驗室分析儀器,面對眾多品牌和型號的分光光度計,用戶該應(yīng)適宜選擇合適的分光光度計。盡管分光光度計種類繁多,但不外乎簡易型、中檔型和型三大類。
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